真境—理论篇
理论篇
（人间的遗物——天然蜂王浆）
一．针灸与王浆酸配合治疗疾病的作用
一．针灸与活血化瘀的关系
1.镇痛作用 
2.调理作用
3. 提高免疫功能作用
上述3个作用均可以通过以下机理实现：针灸可改善局部和远端的血液循环，作用快速（调理）。而血液循环的加快，既有改善局部组织相关营养供应、提高药物浓度作用，还可以降低局部炎性介质（血毒）浓度（镇痛），促进局部细胞免疫与体液免疫功能，加快疾病恢复（提高免疫）。
参考文献
2010-06-16最近发表在《自然－神经科学》杂志网络版上的一项研究成果，揭开了这种 东方医术的神秘面纱。美国纽约州罗彻斯特大学医学中心的神经科学家麦肯·内 德戈德率领的研究团队发现，针灸疗法能够刺激机体释放出一种名叫腺苷的化学物质，从而起到减缓疼痛的作用。
2006-06-10 12:34 据《日本经济新闻》近日报道，日本东京老人综合研究所专家最近通过动物实验发现针灸治疗改善脑血流的机理。报道说，针灸给人带来疼痛和热的刺激，经神经传递，可改善大脑的血液流动。人上了年纪，大脑血液流动衰减，记忆力下降，接受针灸治疗后脑血流有所改善的病例很多，但此前人们并没有找到相关科学依据。东京老人综合研究所专家通过对实验鼠实施针灸，研究针灸如何促进脑血流的变化。研究人员用针刺实验鼠面部，发现实验鼠大脑血流增加10％至20％。这种血流改善的状况可持续1分钟。用针刺入实验鼠腿部，效果基本相同。而切断与脊髓相连的神经，再进行相同的实验，实验鼠大脑血流没有改善。研究人员在研究脑血流增加的实验鼠时发现，大脑皮质分泌的作为神经传递质的乙酰胆碱约增加两倍。研究人员认为，这是因为腿部和面部神经受到刺激产生的兴奋传递给脑神经，促使乙酰胆碱分泌。研究人员指出，老年人的大脑血液流动衰减，记忆力下降。临床有很多接受针灸治疗后脑血流得到改善的病例，此次实验揭示了针灸治疗的机制。
2017/7/1《循证补充与替代医学》杂志上的一项研究中，研究人员测量了这种针灸的生物学效应。新发表的一项研究发现，针灸确实会导致我们的身体发生变化。如果采用正确的针灸方式，你的身体会在插入针头的地方释放更多的一氧化氮，增加血液流动，并引发您的身体释放天然麻醉剂，从而产生升温或变冷的感觉。探索针灸和细胞机制的关系之旅，刚刚开启。
上海针灸杂志2014年1月第33卷第1期 针灸对微循环影响的研究进展
结论：针灸可明显改善微循环状态,且不同穴位之间存在一定差异性。
1.手针针刺内关后,手掌部血流的增加以大小鱼际和手指的部位为主;
2.电针外关和曲池后,指尖和手指血流增加显著;不针刺组血流的自然波动较小[4]。
3.手针和电针足三里即刻、5 min、10 min胃血流量均明显增加,且停针10 min时血流量增加最多,电针组优于手针组,但无显著性差异, 而非针刺组胃血流量在观察时间内逐渐减少。表明针刺足三里可增加胃血流量,改善胃部血液循环。《针刺研究》 2006年01期
针刺“足三里”对大鼠胃血流影响的激光多谱勒血流成像的初步观察张栋 王淑友 李顺月 马惠敏
《中国针灸学会第八届全国中青年针灸推拿学术研讨会论文汇编》2008年
4. 针刺对督脉循行线下深部组织中微循环血流灌注量影响的初步观察
【摘要】：目的观察常态下督脉循行线下深部组织微循环血流灌注量及其在针刺过程中的变化。方法应用瑞典百灵威公司生产的三通道激光多谱勒血流仪(Perimed 5000),对9名健康成年志愿者同步测试督脉循行线下及其左右两侧旁开1cm对照部位的微循环血流灌注量。结果1、常态下沿督脉线下深部组织微循环血流灌注量均较其两侧旁开非经对照点高(P0.01);2、电针后督脉线下深部组织微循环血流灌注量较针前有增高,但尚未达到统计学差异。结论督脉循行线下深部组织中的微循环血流灌注量较其两侧非经对照部位高,电针有使沿经组织的微循环血流灌注量进一步增高的趋势。
针灸调理冲任对输卵管炎性不孕症血流状态的临床观察
【摘要】：目的:观察针灸调理冲任干预输卵管炎性阻塞性不孕症的临床疗效。方法:将符合纳入标准的120例患者按病例数1:1(治疗组:对照组)分组,采用随机、开放对照临床试验设计,观察两组的疗效并分析血沉(ESR)、卵巢动脉血流搏动指数(PI)及阻力指数(RI)。结果:两组患者均有疗效,且治疗组由于对照组;治疗前后卵巢动脉血流搏动指数(PI)及阻力指数(RI)变化有统计学意义;治疗前后2组血沉(ESR)变化无统计学意义。结论:针灸调理冲任对输卵管阻塞性不孕症疗效较好;卵巢动脉血流情况在一定程度上可反应输卵管阻塞性不孕症患者的愈后。
“屋翳”穴与多穴针刺对乳腺增生病模型大鼠乳腺腺体的影响
【摘要】：目的:以乳腺增生病病理形态计量学为标准,筛选治疗乳腺增生病的关键穴位。方法:将Wistar未孕雌性大鼠48只随机分为正常组、模型组、单穴(屋翳)组、多穴组。除正常组外,以苯甲酸雌二醇0.5 mg/kg每日腹腔注射,25 d后改为每日腹腔注射黄体酮4 mg/kg,连续5 d,复制乳腺增生病模型。单穴组取“屋翳”穴,多穴组取“屋翳”“膻中”“合谷”“足三里”穴,每日针刺1次,留针5 min,9次为1疗程,共针刺3个疗程。治疗结束后取大鼠第2对乳房做病理切片,HE染色,镜下观察;美国IPP图像分析软件分析腺泡腔直径及面积。结果:模型组乳腺导管扩张,腺泡腔直径及面积均较正常组增大(均P＜0.01);单穴组、多穴组腺泡腔直径及面积较模型组减小(P＜0.01);单穴组与多穴组腺泡腔直径及面积无显著性差异(P＜0.05)。结论:针刺“屋翳”穴可明显抑制雌激素注射引起的乳腺增生,说明“屋翳”穴是治疗乳腺增生的关键穴位。
【作者单位】： 白求恩国际和平医院 白求恩国际和平医院 白求恩国际和平医院
针刺对小白鼠实验性乳腺增生症抑制作用的病理形态定量研究
【摘要】：对雌二醇（Ｅ２）造模的小鼠乳腺，采用连续纵切片方法，研究乳腺腺泡的病变程度与针刺作用的关系。结果表明：乳腺腺泡的改变及增生程度与针刺的抑制作用有显著的相关性。说明针刺确有抑制Ｅ２所致实验性乳腺增生作用。
二．王浆酸与活血化瘀的关系
1. 王浆酸具有较好的抗菌活性
2. 具有调节免疫系统平衡作用（与针灸作用3相同）
3. 具有良好的抗炎作用（与针灸作用2相同）
4. 具有保肝护肝作用（与针灸作用2相同）
5. 抗衰老美容作用
机制：该物质具有无毒，以调节肝脏功能为核心，发挥上述作用。通过调节肝脏的许多代谢功能，特别是抗氧化途径、抗炎方面就要独特优势。可以减轻血液循环中血管内皮细胞的损伤、减少炎性因子分泌、降低血液粘稠度、提高血运速度，它还具有一定平衡脂代谢、糖代谢、血压作用，外用具有抗菌抗炎促进伤口愈合特性。是一种非常优秀独特的保健调理健康状态佳品。
相关支持文献：
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9.Royal jelly attenuates azathioprine induced toxicity in rats Article ·蜂王浆通过降低血清肝酶活性的升高，对硫唑嘌呤诱导的肝损伤有显着的保护作用。此外，蜂王浆通过减少丙二醛的形成阻断硫唑嘌呤诱导的脂质过氧化。总之，蜂王浆具有减弱硫唑嘌呤诱导的毒性的能力。
10. The efficacy of Royal Jelly in the restoration of alcoholic liver injury in mouse model Article in Biomedical Research 22(1):1-8 对酒精诱导的肝肿大的预防作用和（2）恢复由肝细胞受损引起的转氨酶水平的功能。蜂王浆调节酒精性肝损伤的重要免疫现象包括（1）肝脏自然杀伤细胞的活化和（2）控制se-rum中IL-4，IL-5和TNF-α的水平。这些研究结果证明，蜂王浆可能具有恢复酒精性肝病患者免疫系统功能的能力。
11. Biomedicine & Pharmacotherapy Volume 106, October 2018, Pages 1490-1498 The potential hepatoprotective effect of royal jelly against cadmium chloride-induced hepatotoxicity in mice is mediated by suppression of oxidative stress and upregulation of Nrf2 expression 蜂王浆对氯化镉诱导的小鼠肝毒性的潜在保肝作用是通过抑制氧化应激和上调Nrf2表达。
12.中西医结合肝病杂志 2010年第 20卷第 3期
10-羧基-2-癸烯酸及蜂王浆防治大鼠肝纤维化的实验研究*
茹清静1, 2 施维群2 李天一1 章 亮2 徐 珊1
11 浙江中医药大学(浙江杭州, 310005) 21 浙江中医药大学附属第二医院肝病中心
结论: 癸烯酸和蜂王浆对CC l4 肝纤维化大鼠的肝脏纤维化血清学指标及肝脏病理形态学均具有显著的改善作用, 但对已经形成肝纤维化后的肝组织纤维化改善不明显, 且癸烯酸和蜂王浆两者之间的疗效差异无显著性意义。其可能的机制为癸烯酸加蜂王浆能改善肝组织的炎症、减少ECM 的合成和抑制TGF-B1的分泌
10-hydroxy-2-decenoic acid of royal jellyexhibits bactericide and anti-inflammatory activity in human colon cancercells.
Yang YC, Chou WM, Widowati DA, Lin IP, Peng CC. BMC Complement Altern Med. 2018 Jul 3;18(1):202. doi: 10.1186/s12906-018-2267-9.PMID: 29970062
蜂王浆的10-羟基-2-癸烯酸在人结肠癌细胞中显示出杀菌和抗炎活性
背景 蜂王浆（RJ）是女王蜜蜂幼虫的专属食品，被认为是促进人类健康的新型补品。 RJ的功能可归因于其主要且独特的脂肪酸，10-羟基-2-癸烯酸（10-HDA）。目前的研究调查了10-HDA对人结肠癌细胞WiDr的抗炎症功能，以及它对病原菌生长的影响。
13. 方法 通过酶联免疫吸附测定（ELISA）或蛋白质印迹分析WiDr细胞中的促炎细胞因子，受体拮抗剂细胞因子（IL-1ra）和核因子-κB（NF-κB）。通过测定最小抑制浓度（MIC）和最小杀菌剂浓度（MBC）来评估10-HDA对细菌的生长抑制。
结果 通过10-HDA调节WiDr细胞中促炎细胞因子，白细胞介素（IL）-8，IL-1β和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的产生。 10-HDA在3mM时IL-8显着下降，而IL-1β和TNF-α显着下降。 10-HDA以剂量方式增加IL-1ra。 NF-κB途径主要是对原型促炎细胞因子的反应，并且在10-HDA处理后NF-κB减少。 10-HDA作为针对动物或人类特异性病原体的有效杀菌剂，包括金黄色葡萄球菌，溶血性链球菌，中间葡萄球菌B，木糖葡萄球菌，辣椒沙门氏菌，副溶血性弧菌和大肠杆菌（溶血性）。结论 目前的研究表明，来自RJ的体外10-HDA在WiDr细胞中表现出抗炎活性，以及对动物病原体的抗细菌活性。 10-HDA显示出其作为抗起泡剂和杀菌剂的潜力，有益于人体胃肠道。
当这两种技术结合调理一些健康状态不佳，以及一些疑难杂症时，不失为一种相当科学、可靠、安全的手段。理论是：针灸可以快速调节人体的某些功能，如局部血液循环，改善微环境，利于调理机体功能，但是它的作用持久性和从根本上消除有害相关因子方面存在很大缺陷，则需要王浆酸的特性来弥补其不足。王浆酸则以肝脏为最重要的调节靶器官，调节某些异常的肝功能使之恢复平衡。肝脏作为人体最大的营养素加工处理厂，解毒车间。如果运行出现障碍，不灵，亚健康与疾病就会出现。恢复肝脏功能平衡则是王浆酸的主要优势之一。具有无毒、安全、有效、口服方便、稳定性好、易保存特点。
二．王浆酸对人体皮肤各类色斑调理作用
什么是色斑？
是指和周围颜色不同的斑点。包括雀斑、黑斑、黄褐斑和老年斑等，属色素障碍性皮肤病。由于皮肤黑色素的增加而形成的一种常见面部呈褐色或黑色素沉着性、损容性的皮肤疾病，多发于面颊和前额部位，日晒后加重，多见于女性，与妊娠、长期月经紊乱有关。
各类色斑是如何形成的？
1.黑斑的形成
（1）紫外线照射是造成斑的头号杀手，一般人晒太阳所引起的黑色素沉积，会随人体新陈代谢而排掉，但有些人可能新陈代谢较慢或是年纪较大，而留下黑色素，形成黑斑。
（2）使用过期或劣质化妆品导致的金属物质中毒，如铅、汞、砷中毒等。
（3）皮肤外伤时，有粉尘、墨水等异物嵌入伤口；使用碘酒、紫药水；或过食含色素的食物，如酱油、黑木耳等，都会造成色素沉积，形成黑斑。
（4）生活习惯问题。压力、偏食、睡眠不足等不良生活习惯也会令黑色素增加。所以睡眠时间不稳定的人，皮肤的代谢率也不佳，会影响黑色素颗粒的产生。
2.雀斑的形成
（1）遗传因素是雀斑形成的主要原因，不一定是遗传自父母，有可能是隔几代遗传。一般来说雀斑大多出现于皮肤较白的脸上。
（2）曝晒于阳光下，阳光中的紫外线一方面刺激皮下的色素细胞活动频繁，制造出大量的黑色素；另一方面损伤皮肤细胞正常的新陈代谢功能，令黑色素无法顺利排出而残留在皮肤上，甚至沉积在真皮中。所以过度的日晒会加重、加深雀斑，但到了冬天雀斑又会逐渐变淡。
3.黄褐斑的形成
是由于组织细胞间的微细循环受淤阻，细胞溶解死亡，黑色素增多形成色斑沉着所造成的，脸部的表皮层最薄，毛细血管最丰富，也最易形成色素沉着，色素沉着部位主要在表皮基底层，黑色素颗粒明显增多，较为严重者真皮层的噬黑素细胞内也有较多黑色素，与正常相比，色素细胞的数目，黑色素形成以及黑色素颗粒的活性都有不同的增长。
（1）人体内阴阳失衡，一因肝气郁结，致使血瘀颜面；二因脾胃虚弱，气血不能润泽颜面，湿热上升至颜面形成斑点；三因肾阳不足，阳气弥散，血瘀颜面形成黄褐斑。
（2）怀孕后胎盘分泌雄孕激素增多，所以孕期女性面颊部常见对称分布的黄褐斑，但生产后体内雄孕激素分泌恢复正常状态后，大部分人的斑会自然减轻或消失。
（3）药物因素，长期口服避孕药的女性9%～20%易发黄褐斑，有人甚至在口服避孕药一个月后便出现面部斑点，此外服用高血压、糖尿病的药和多食感光性较强的食物，如芹菜、香菜、胡萝卜等也容易引起黄褐斑。
（4）一些慢性疾病如慢性肝炎、结核病等会导致酪氢酸酶活性增强，黑色素产生增加，而机体自身排除黑色素的能力却随之减弱，黑色素一旦不能及时排出体外，久而久之也会在面部产生黄褐斑；另外化妆品使用不当也会加重、加快黄褐斑的形成，诸多色斑成因。
4.妊娠色斑的形成
妊娠色斑其实和妊娠纹出现的原理一样，都是由于孕期的特殊生理状况，怀孕期间荷尔蒙的变化会促使体内黑色素暂时增加，黑色素是人体内天然产生的物质，头发、皮肤和眼睛的颜色都来源于它。分娩几个月后，孕期色素沉着的部位很可能渐渐褪色，皮肤应该能够恢复正常的颜色，不过，有些女性的妊娠斑并不会完全消失，可以采取一些安全的措施，尽量减轻肤色加深的程度。
5.老年斑，是人体在代谢过程中，会产生一种叫做“游离基”的物质，即脂褐质色素，这种色素在人体表面聚集，即形成老年斑。人在青壮年时期，体内有天然的抗氧化剂和抗氧化酶，这些抗氧化物质会使游离基变为惰性化合物，不能生成过氧化脂质，故不能对细胞有所破坏。然而，随着年龄的增长，体内的抗氧化功能逐步减退，到了老年时体内游离基便会起破坏作用了。一般认为，老年斑是组织衰老的一种先兆斑，表示细胞进入了衰老阶段。
得了老年斑的危害性
老年斑是组织衰老的一种先兆斑，表示细胞进入了衰老阶段。在人体的心肌、肝脏、神经细胞以及肾上腺皮质的细胞内，都存在着一种叫做“脂褐质”的色素，它是细胞氧化后的产物。它不仅聚集在体表的细胞膜上，也会侵犯人体内各系统器官，而且还侵扰机体内部，如果沉积在血管壁上，会使血管发生纤维性病变，导致动脉硬化、高血压、心肌梗塞；积存于脑细胞时，影响脑功能，从而加速了脑衰老过程，还会引起老年人记忆、智力障碍，抑郁症，甚至老年痴呆。这种物质在细胞内积蓄，便会妨碍细胞的正常代谢，对细胞组织功能活动的妨碍也就愈大、引起整个机体衰老，最后导致死亡。减少或消除两年半只有增加体内的抗氧化剂。
王浆酸对抗色斑的作用
首选王浆酸作为抗氧化制剂特性：无毒、安全有效、稳定、小分子易吸收。外用：对皮肤具有抗菌、抗炎、抗黑色素产生（美白）、抗皮肤衰老、保湿、促伤口愈合作用。口服：除了上述作用以外，还有调节肝功能，平衡代谢，促进解毒等作用。
参考文献
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7. 10-hydroxy-2-decenoic acid of royal jelly exhibits bactericide and anti-inflammatory activity in human colon cancer cells. Yang YC, Chou WM, Widowati DA, Lin IP, Peng CC.BMC Complement Altern Med. 2018 Jul 3;18(1):202
三．蜂王浆在男性和不孕不育上的应用
一、与男人有关的问题
减少前列腺增生，降低血液中的前列腺特异性抗原（PSA）水平。
提高男性性激素水平。
3、提高体能，改善了红细胞生成，葡萄糖耐量和心理健康。
二、不孕不育
1. 用于提高男性和女性的生育能力。通过提高男性精子的质量来提高男性的生育能力，通过提高女性的卵子的质量来提高女性的生育能力。
2. 精子发生率显著提高，精子体积、精密度和迁移率提高。
综述：通过提高人体糖代谢、脂代谢能力，抗缺氧水平，提高血管功能、免疫功能、激素应答水平等。从男女性的全身心的角度，调理生育能力和性能力。即不是从某一器官，也不是某一系统。
参考文献
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四．有关蜂王浆治疗肿瘤文献
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10-hydroxy-2-decenoic acid of royal jelly exhibits bactericide and anti-inflammatory activity in human colon cancer cells.
Yang YC1, Chou WM1, Widowati DA1, Lin IP1,2, Peng CC3.
Abstract
BACKGROUND:
Royal jelly (RJ), the exclusive food for the larva of queen honeybee, is regarded as the novel supplement to promote human health. The function of RJ may be attributed to its major and unique fatty acid, 10-hydroxy-2-decenoic acid (10-HDA). The current study investigated the anti-inflammory function of 10-HDA on human colon cancer cells, WiDr, as well as its effect on the growth of pathogenic bacterium.
METHODS:
The pro-inflammatory cytokines, receptor antagonist cytokine (IL-1ra) and nuclear factor-kappa B (NF-κB) in WiDr cells was analyzed by Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) or western blot. The growth inhibition of 10-HDA on bacterium was evaluated by determination of minimal inhibitory concentrations (MIC) and minimal bactericide concentrations (MBC).
RESULTS:
The production of pro-inflammatory cytokines, Interleukin (IL)-8, IL-1β and tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) in WiDr cells was modulated by 10-HDA. IL-8 were dramatically declined by 10-HDA at 3 mM, while IL-1β and TNF-α were significantly decreased. 10-HDA increased IL-1ra in a dose manner. NF-κB pathway is primarily in response to prototypical pro-inflammatory cytokines, and NF-κB was reduced after 10-HDA treatment. 10-HDA acted as potent bactericide against animal- or human-specific pathogens, including Staphylococcus aureus, Streptococcus alactolyticus, Staphylococcus intermedius B, Staphylococcus xylosus, Salmonella cholearasuis, Vibro parahaemolyticus and Escherichia coli (hemolytic).
CONCLUSIONS:
The current study showed that in vitro 10-HDA from RJ exhibited anti-inflammatory activity in WiDr cells, as well as anti-bacterial activity against animal pathogens. 10-HDA showed its potential as anti-imflammtory agent and bactericide to benefit human gastrointestinal tract.
目前的研究表明，来自RJ的体外10-HDA在WiDr细胞中表现出抗炎活性，以及对动物病原体的抗细菌活性。 10-HDA显示出其作为抗起泡剂和杀菌剂的潜力，有益于人体胃肠道。
2. Review Anti-Cancer and Protective Effects of Royal Jelly for Therapy-Induced Toxicities in Malignancies
Yasuyoshi Miyata * and Hideki Sakai Department of Urology, Nagasaki University Graduate School of Biomedical Sciences, Nagasaki 852-8501, Japan; hsakai@nagasaki-u.ac.jp * Correspondence: int.doc.miya@m3.dion.ne.jp
Received: 1 September 2018; Accepted: 17 October 2018; Published: 21 October 2018
Abstract: Royal jelly (RJ) is a glandular secretion produced by worker honeybees and is a special food for the queen honeybee. It results in a significant prolongation of the lifespan of the queen honeybee compared with the worker honeybees through anti-inflammatory, anti-oxidant and anti-microbialactivities. Consequently,RJisusedascosmeticanddietarysupplementthroughoutthe world. In addition, in vitro studies and animal experiments have demonstrated that RJ inhibits cell proliferationandstimulatesapoptosisinvarioustypesofmalignantcellsandaffectstheproductionof various chemokines, anti-oxidants and growth factors and the expression of cancer-related molecules in patients with malignancies, especially in patients treated with anti-cancer agents. Therefore, RJ is thought to exert anti-cancer effects on tumor growth and exhibit protective functions against drug-induced toxicities. RJ has also been demonstrated to be useful for suppression of adverse events, the maintenance of the quality of life during treatment and the improvement of prognosis in animal models and patients with malignancies. To understand the mechanisms of the beneficial effects of RJ, knowledge of the changes induced at the molecular level by RJ with respect to cell survival, inflammation, oxidative stress and other cancer-related factors is essential. In addition, the effects of combination therapies of RJ and otheranticanceragentsornaturalcompoundsareimportanttodeterminethefuturedirectionofRJ-basedtreatmentstrategies.Therefore,inthisreview, we have covered the following five issues: (1) the anti-cancer effects of RJ and its main component, 10-hydroxy-2-decenoicacid;(2)theprotectiveeffectsofRJagainstanti-canceragent-inducedtoxicities; (3) the molecular mechanisms of such beneficial effects of RJ; (4) the safety and toxicity of RJ; and (5) thefuturedirectionsofRJbasedtreatmentstrategies,withadiscussiononthelimitationsofthestudy of the biological activities of RJ.Keywords: royal jelly; 10-hydroxy-2-decenoic acid; anti-cancer effects; toxicities; malignancies
（1） RJ及其主要成分，反 -10-羟基-2-癸烯酸的抗癌作用;（2）RJ对抗癌症引起的毒性的保护作用;; （3）RJ的这种有益效应的分子机制; （4）RJ的安全性和毒性; （5）基于RJ的治疗策略的结果，并讨论了RJ生物活性研究的局限性。
3. Antitumor and immunopotentiating effect of 10-hydroxy-2-decenoic acid on tumor-bearing mice
Journal of Beijing Medical University [01 Jan 1996, 27(5):331-333] Wang Guoyan , Lin Zhibin
Abstract
The effect of 10-HDA ip on the weight of tumor,survival time and delayed type hypersensitivity (DTH) was observed in S180 or EAC bearing mice.10-HDA significantly decreased tumor weight in S180-bearing mice,prolonged the survival time in EAC-bearing mice and restored the decreased DTH in both kinds of tumor bearing mice.These results indicate that 10-HDA ip had antitumor and immunopotentiating effects, the latter may involve the antitumor acivity of 10-HDA in vivo.
在携带S180或EAC的小鼠中观察到10-HDA ip对肿瘤重量，存活时间和迟发型超敏反应（DTH）的影响.10-HDA显着降低S180荷瘤小鼠的肿瘤重量，延长了EAC的存活时间。在两种荷瘤小鼠中，小鼠均恢复降低的DTH。这些结果表明10-HDA ip具有抗肿瘤和免疫增强作用，后者可能涉及体内10-HDA的抗肿瘤活性。
4. Activity of 10-Hydroxydecenoic Acid from Royal Jelly against Experimental Leukæmia and Ascitic Tumours
GORDON F. TOWNSEND, JOSEPH F. MORGAN & BARBARA HAZLETT
Naturevolume183, 1270–1271 (1959) | Download Citation
Abstract
DESPITE many investigations of royal jelly1, its chemistry and pharmacological activity have not been completely established. As part of a long-term study on the chemistry and biological activity of royal jelly2 we have recently investigated its possible anti-tumour properties. In this communication we wish to report that admixture of royal jelly with tumour cells before inoculation completely suppresses the development of a transplantable mouse leukæmia and the formation of ascitic tumours in mice. Fractionation studies have established that this anti-tumour activity resides in the main fatty acid of the royal jelly—10-hydroxydecenoic acid.
报告在接种前蜂王浆与肿瘤细胞的混合物完全抑制可移植的小鼠白血病的发展和小鼠腹水肿瘤的形成。分级研究已经证实，这种抗肿瘤活性存在于蜂王浆的主要脂肪酸中即-10-羟基癸烯酸。
5. Royal jelly lipophilic fraction induces antiproliferative effects on SH-SY5Y human neuroblastoma cells
Authors: Angelo Gismondi Eleonora Trionfera Lorena Canuti Gabriele Di Marco Antonella Canini
View Affiliations
Published online on: July 24, 2017 https://doi.org/10.3892/or.2017.5851
Pages: 1833-1844
Abstract
Royal jelly (RJ) is one the most important bee product because it strongly influences the larval development in the hive, including the queen bee. In literature, RJ is known for its antioxidant, immunoregulatory, antifungal, antibiotical, erythropoietic, hypoglycemic, anticholesteremic, antithyroidic, anti-osteoporotic and estrogenic properties. However, it is surprising how rare the scientific evidence about RJ antineoplastic capacity are. That being said, we investigated, for the first time, the in vitro bioactivity of six different RJs on the growth of three different mammalian cell lines: immortalized murine myoblasts (C2C12), human prostate cancer (PC3) and human neuroblastoma (SH-SY5Y). These studies were performed treating the cells with the only lipophilic, or hydrophilic, fraction of the RJs, a scientific approach never performed before. Moreover, chemical and protein profiles of all RJs were finely characterized, in qualitative and quantitative terms, by GC-MS and 1D-SDS-PAGE, respectively, in order to give a complete framework to the research. Despite the deep differences we found in the composition of each sample, unexpectedly, RJs showed comparable or very similar biological effects. In particular, our attention was captured by the extraordinary antiproliferative activity of the lipophilic extract of all RJs against SH-SY5Y cells, suggesting a potential medical application of this bee product to prevent the onset and slow down the growth of human neuroblastoma.
我们首次研究了六种不同RJ对三种不同哺乳动物细胞系生长的体外生物活性：永生化小鼠成肌细胞（C2C12），人前列腺癌（PC3）和人神经母细胞瘤（SH-SY5Y））。这些研究是用RJs的唯一亲脂性或亲水性部分处理细胞，这是以前从未进行过的科学方法。我们发现RJ的亲脂性提取物对SH-SY5Y细胞的特殊抗增殖活性，这表明该蜂产品可能用于预防人类神经母细胞瘤的发病和减缓其生长。
王浆酸对胆结石的治疗可能机理
胆囊结石与多种因素有关
1、胆汁的理化改变：长期高蛋白，高脂肪，高热量膳食使体内胆固醇增加或肝脏合成胆固醇量增多，造成胆汁中胆固醇过饱和；或者某些肠道疾病由于丧失了胆盐，也使胆固醇处于相对过饱和状态。
2、胆汁的淤滞：如胆囊、胆管形态的异常导致胆汁排泄不畅。
3、生活习惯：爱静不爱动、不能按时进餐或不食早餐、盲目节食减肥或喜食甜食。
4、胆道感染，胆囊壁发炎，其收缩功能减退。
5、某些溶血性疾病或肝硬变时也可导致胆囊结石，但这种结石多半是黑色结石。
6、由于妊娠引起的胆汁淤滞，神经系统平衡失调，也可引起胆囊结石。
7、长期禁食，静脉内营养，可导致胆囊内胆汁淤滞，结石形成。
8、胃大部分切除或迷走神经干切断术后，也可使胆囊排空延迟，利于胆石的形成。
9、 一些药物可使胆石病易于发生。如口服避孕药、雌激素
王浆酸对胆结石的治疗可能机理
1. 王浆酸具有提高身体免疫力，增加胆囊局部抗菌作用
2. 通过调节肝脏脂代谢，降低胆结石形成
3. 通过扶正，调节胆汁代谢平衡，阻止胆结石的发展
4. 增加胆囊上皮细胞抵抗无菌性炎症能力
1、Mihajlovic D., Rajkovic I., Chinou I., Colic M. Dose-dependent immunomodulatory effects of 10-hydroxy-2-decenoic acid on human monocyte-derived dendritic cells. J. Funct. Foods (2013).5 838–846.
2、Sugiyama T., Takahashi K., Tokoro S., Gotou T., Neri P., Mori H.. Inhibitory effect of 10-hydroxy-trans-2-decenoic acid on LPS-induced IL-6 production via reducing IkappaB-zeta expression. Innate Immun. (2012) 18 429–437。
3、Yang YC, Chou WM, Widowati DA, Lin IP, Peng CC. 10-hydroxy-2-decenoic acid of royal jelly exhibits bactericide and anti-inflammatory activity in human colon cancer cells. BMC Complement Altern Med. 2018 Jul 3;18(1):202.
4、Michael J. Weiser 1, Vivian Grimshaw 1, Kelly M. Wynalda 1, M. Long-Term Administration of Queen Bee Acid (QBA) to Rodents Reduces Anxiety-Like Behavior, Promotes Neuronal Health and Improves Body Composition. Nutrients 2018, 10, 13。
5、132. Makino J., Ogasawara R., Kamiya T., Hara H., Mitsugi Y., Yamaguchi E., et al. (2016). Royal jelly constituents increase the expression of extracellular superoxide dismutase through histone acetylation in monocytic THP-1 cells. J. Nat. Prod. 79 1137–1143.
未来医学的发展趋势—营养医学
营养治病，这对我国人来说还是一个非常陌生的概念。
真正能让自己康复的绝对不是药物，因为药物的成分不是细胞修复所需要的成分。
而一旦给足时间，给足营养物质，如蛋白质、维生素、矿物质、脂肪等这些人体构成所需要的材料，人体就会启动自我修复的过程。
只要营养充足，受损的器官通过细胞的不断“新陈代谢”和“自我修复”，经过一段时间，受损的组织和器官就会被“软性置换”，产生出“新”的组织与器官。很多很多的疾病， 都有机会彻底康复！
营养治病，这对我国人来说还是一个非常陌生的概念。
几乎所有的人都可能认为疾病只有用药物去治疗，营养怎么可能被用来治病呢？
一、营养是生命的源泉。
那让我们来看这样一个事实：如果一个健康的人7—10天不吃任何食物，不喝水，你说会发生什么事情？
人用来维持生命的主要东西除了空气和水以外就是食物，也就是食物里面的营养给予了人的生命。
营养是生命的源泉，从人的胚胎形成的一瞬间到人的生命结束，营养无时无刻不滋养着人的生命，这就是“营养与生命”。
二、药物控制疾病。
看看我们身边那些身患疾病的人：高血压、心脑血管疾病、糖尿病、痛风、乙肝、脂肪肝、甲亢、关节炎、胃炎、严重失眠、癌症等，面对这一大堆常见慢性病，通过药物可以将疾病治愈？
其实药物顶多就是将慢性病症控制在一定范围内，能做到这一点已经算不错了。
三、营养修复细胞。
而真正能让自己康复的绝对不是药物，因为药物的成分不是细胞修复所需要的成分。
而一旦给足时间，给足营养物质，如蛋白质、维生素、矿物质、脂肪等这些人体构成所需要的材料，人体就会启动自我修复的过程。
因为所有人身上的细胞在经过六个月左右的时间，大部分细胞组织都会被更新90%，产生新的组织。
胃细胞7天更新一次；
皮肤细胞28天左右更新一次；
肝脏细胞在180天更换一次；
红血球细胞120天更新一次；
在一年左右的时间，身体98%的细胞都会被重新更新一遍。只要营养充足，受损的器官通过细胞的不断“新陈代谢”和“自我修复”，经过一段时间，受损的组织和器官就会被“软性置换”，产生出“新”的组织与器官。
很多很多的疾病， 都有机会彻底康复！
类风湿性关节炎（RA）
国际免疫药理学28 (2015) 97–104
10-羟基-2-癸烯酸通过PI3K–Akt通路抑制成
纤维样滑膜细胞的增殖
温州医科大学基础医学院生物化学教研室 王建光等
石家庄国际和平医院 修贺明教授译
摘要：揭示10h2da抑制类风湿性关节炎（RA）患者滑膜成纤维样细胞的增殖（FLSs）机制。10h2da干预滑膜成纤维样细胞，观察滑膜成纤维样细胞组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）活性和组蛋白乙酰化水平。采用MTT法检测细胞增殖 比色法测定HDAC酶活性和Western Blot法检测组蛋白乙酰化水平。收集类风湿性关节炎患者的滑膜成纤维样细胞，在原代培养时使用10h2da处理，应用人类转录组1.0ST微阵列芯片筛选出不同的基因，并通过实时聚合酶链反应验证。经10h2da处理的FLSs细胞增殖活力和HDAC酶活性降低，结果呈剂量依赖性和时间依赖性。时间依赖性的诱导组同一时间H3和H4的乙酰化，通过HTA 1确定了697个不同的基因。实时定量PCR显示， PI3K–AKT通路的7个靶基因表达减少。4个相互作用细胞因子及其受体的靶基因表达增加。这些结果说明，10H2DA是一个潜在的组蛋白去乙酰化酶抑制剂 （HDACI），通过PI3K–AKT通路抑制FLS细胞增殖。
据报道，10h2da对哺乳动物具有的生理和药理作用。抗肿瘤【3-5】、抗生物【6】、抗高胆固醇血症【7】、促进神经再生 [ 8 ]、抑制血管生成[ 9 ]、促进胶原生产[ 10 ]、和免疫调节作用[ 11，14 ]。最后三个功能有助于DRSI（疾病相关类风湿关节炎的症状改善)。在我们以前的研究报告指出10h2da抑制FLS细胞的增殖活性和类风湿性关节炎的基质金属蛋白酶（MMPs）活性 [ 15 ]。10h2da下调MMPs的表达浓度和抑制结缔组织生长因子（CTGF）表达[ 16 ]。但其10h2da抑制滑膜细胞增殖的作用机制仍然是难以捉摸的。
表观遗传学的改变包括DNA遗传修饰.它的遗传密码的碱基序列没有任何改
变[17]。 对组装核小体和染色质折叠来说，组蛋白的修饰，乙酰化是非常重要的。染色质区域乙酰基转移酶(HATs)催化的赖氨酸乙酰化，通常形成是活跃的转录。而且这个区域也是组蛋白去乙酰化酶（HDACs）结合区域，与赖氨酸去乙酰化和转录不活跃有关 [18]。因此，组蛋白乙酰基转移酶和组蛋白去乙酰化酶分别属于复合蛋白共活化剂或核处理复合物。HDACs是众所周知的促进转录抑制和基因沉默，即在靶基因启动子的组蛋白核心蛋白上去除乙酰基，结果是转录活性降低[19]。据报道，组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACis）可以减少炎性细胞因子（如TNF-α，IL-1β，TGF-β和IL-8）和下调免疫应激。这也有助于各种炎症性疾病[20]。此外，组蛋白去乙酰化酶抑制剂能减少大鼠佐剂性关节炎模型的关节肿胀，内膜单核细胞浸润，抑制滑膜增生，抑制血管翳形成，及防止软骨和骨破坏 [21]。同样，HDACi在小鼠抗体介导的关节炎模型上也获得了有益的结果[ 22 ]。
已知10h2da是短链脂肪酸，HDACi活性在蜂王表型的维持起重要作用[ 23 ]。我们认为10h2da可能作为脂肪酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂，抑制FLS增殖细胞。现在的研究目标是确认10H2DA 的HDAC活性抑制效应。在10H2DA干预的 FLS细胞之后，使用微阵列芯片筛选出不同的基因和相应的通路。
图1。10h2da对类风湿性关节炎 FLS细胞活力的影响HDACs活性。
A.采用MTT比色法测定的分析FLS细胞活力。用不同浓度10h2da干预 （50 nM，100 nM，200 nM和400 nM）和TSA（100 nM）0 h，6 h，12 h，24 h和48 h后。 FLS细胞存活率呈剂量依赖性和时间依赖性的降低。然而，在200 nM和400 nM的10h2da之间没有显著差异。
B. HDAC活性测定，RA的FLS细胞在不同浓度的10h2da（50 nM，100 nM，200 nM和400 nM）和TSA（100 nM）0 h，6 h，12 h，24 h和48 h处理细胞，在37。C使用比色HDAC活性检测试剂盒。10h2da干预FLS细胞组蛋白去乙酰化酶活性降低，呈剂量、时间依赖性。然而，在200 nM和400 nM的10h2da之间没有差异。
C.实时PCR扩增HDAC1，HDAC2和HDAC3对FLS治疗10h2da细胞（200 nm）0 h，6 h，12 h，24 h和48 h的结果,β-肌动蛋白作为内控.
D.上面板显示的Western Blot分析HDAC1，HDAC2，HDAC3，乙酰化的组蛋白H3 和H4,在10h2da（200nM）0 h，6 h，12 h，24 h和48 h干预后滑膜细胞。下面板显示正常密度。所有实验均至少一式三份，值表示为平均±SD控制组的百分比，* P<0.05，与对照组相比，星号代表差异显著。
结果：
1.10H2DA抑制FLS细胞活性
采用MTT法检测FLS细胞活力。不同浓度的10h2da（50nM，100nM，200nM和400 nM）和TSA（100 nM，阳性对照）0 h，6 h，12 h，24 h48 h的结果,细胞活力下降呈剂量依赖性和时间依赖性。尽管如此，200nM和400nM处理的细胞之间抑制程度没有显著差异对FLS细胞活力10h2da（100 nm）近似于TSA（100 nm）抑制程度没有显著差异（图1A）。
2.10h2da抑制HDAC的活性和增加乙酰化组蛋白水平
采用比色法HDAC活性试剂盒测定HDAC活性.10h2da 干预FLS细胞HDAC活性降低呈剂量依赖性和时间依赖性。10h2da（100 nM）近似于TSA（100 nM）对HDAC活性抑制作用。尽管如此，200nM和400 nM之间（图1b）处理的细胞也没有什么区别。所以浓度200 nM10h2da进行如下实验。对 HDAC1、HDAC2 和 HDAC3 进行实时PCR扩增和酶免疫印迹分析，10H2DA(200 nM) 干预FLS细胞 0 h, 6 h, 12 h, 24 h 和 48 h，结果表明：HDAC1、HDAC2 and HDAC3的 mRNA和蛋白水平表达高低之间没有显著差异。H3和H4乙酰化水平用Western印迹法进行处理后，确认10h2da（200 nm）0 h，6 h，12 h，24 h和48 h的处理后的滑膜细胞，H3和H4的乙酰化水平增加。归一化光密度读数显示，10H2DA处理后的FLS细胞H3和H4的乙酰化水平呈时间依赖性增加。表明10h2da是通过抑制HDAC的活性，诱导滑膜细胞组蛋白高乙酰化（图1C和D）。
3.类风湿患者的 FLS细胞经10H2DA处理后下游基因的筛选
FLS细胞经10H2DA处理后，进行三个独立的实验。确定不同基因的分布。RVM（随机方差模型）的t检验适用于控制组和实验组之间筛选不同基因的。一个显著分析和FDR（false discovery rate假发现率）分析后,697不同的基因被筛选出来，根据 P-value 的阈值(P<0.05),其中311个基因上调，其余386个基因下调。不同的基因被列在补充表2。
4.不同基因的通路分析
我们也提交了所有不同基因到 GO（基因本体数据库）发现更多
具体功能描述。数据库建议117 GOs明显富集(−log(p-value) ﹥ 2),其中，51 GOs上调, 66 GOs 下调（图2）。通路分析数据库显示，15条途径明显富集(-log(p-value) ﹥ 2),7个途径上调(嗅觉转导，细胞因子-细胞因子受体相互作用,神经活性配体受体相互作用，补体和凝血级联反应，粘着连接，原发性免疫缺陷,ABC转运蛋白）和8途径下调(细胞外基质相互作用，灶性–粘附，PI3K AKT信号通路，致心律失常性右心室心肌病（ARVC），调节肌动蛋白细胞骨架，肥厚性心肌病，扩张型心肌病（HCM）和癌症的蛋白多糖），其中PI3K– Akt信号通路有不同的基因低表达，包括ppp2r3a，ITGA2，PDGFC，ITGA11，PDGFD，itgb5 COL6A1，COL6A2 LAMB2，，，tnxb，thbs3，LAMA2，lpar4和ITGB3，和细胞因子及其受体的相互作用不同的基因通路的过度表达明显，包括IL7R，IL23R，TNFRSF10A，TNFSF13B，il15ra，INH，PPBP，CNTFR和CXCL3，分别。PI3K–Akt信号通路下调与类风湿性关节炎的病理改变FLS 细胞增殖相关 [36,37],上调细胞因子途径与类风湿关节炎的炎症反应有关 [38,39],细胞因子-细胞因子受体相互作用通路在炎症反应中起重要作用。所以我们验证了这2种途径的不同蛋白质。
5.不同基因的实时定量聚合酶链反应验证
不同基因的P值的定义。实时定量PCR进行验证， (fold >1.5).PI3K途径和细胞因子-细胞因子受体相互作用（图3）。这个结果表明，PI3K，ITGA2，ITGA11，PDGFD,tnxb，thbs3，LAMA2和lpar4 mRNA的表达减少.10H2DA (200 nM) 干预FLS 细胞 24 h后IL7R，TNFSF13B，ppbp,CNTFR mRNA表达升高。 10H2DA控制比率分别为0.41, 0.36, 0.30, 0.46, 0.35, 0.45, 0.58, 0.44, 3.02, 1.78, 2.00 and 2.73 (Fig. 4A),此数据与的基因芯片表达变化相同。
Fig. 4. Validation of different genes of PI3K–AKT pathway and cytokine–cytokine receptor interaction pathway A. Quantitative real-time PCR of different genes in FLS cells treated with 10H2DA or PBS. The results were normalized for the amount of β-actin as internal control. Each value represents the average from 10 individual experiments. B.Western blot analysis of PI3K, AKT and pAKT in FLS cells treated with 200 nM 10H2DA for 0 h, 6 h, 12 h, 24 h and 48 h. Densitometry normalization reveals a time-dependent decrease of PI3K and pAKT in FLS cells treatedwith 10H2DA. All experimentswere performed at least in triplicates, values are expressed as the percentage of control group presented asmean±SD, *p ＜ 0.05, compared with control, the asterisks represent significant differences.
FLS细胞PI3K， AKT，pAkt Western blot分析，归一化定量数据， PI3K，pAKT 显示时间依赖性的表达减少(Fig. 4B)。
讨论: 类风湿关节炎是一种全身性的慢性炎症性疾病.主要攻击关节滑膜。类风湿关节炎的特点之一是活化滑膜细胞过度增殖和血管翳的形成，侵犯邻近的软骨和骨[40]。因此，抑制滑膜细胞增殖是类风湿关节炎治疗的理想靶点。我们以前研究发现，10h2da可以抑制类风湿关节炎的FLS细胞增殖[15]和延缓关节牵张在CIA小鼠模型（未发表的观察）。
在这项研究中，结果表明：FLS细胞生存能力与10h2da浓度和作用时间成反比。并发现10h2da抑制RAFLS细胞的增殖。
10h2da也抑制H4,H3去乙酰化。这可能是由于抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的HDAC活性或降低酶的mRNA表达水平或蛋白水平。10h2da呈剂量依赖性和时间依赖性降低滑膜细胞HDAC活性，HDAC1，HDAC2和HDAC3之间的活性并没有显著的差异。与HDACs的mRNA表达水平和蛋白水平是不相关的。这表明10h2da抑制滑膜细胞增殖可能是通过抑制HDAC活性有关，10h2da是一类广谱组蛋白去乙酰化酶抑制剂。组蛋白去乙酰化酶抑制剂最近成为有效的消炎药[ 41 ]，通过减少滑膜组织HDACs的表达和动态调节胞内信号途径，可能有助于治疗RA发病和其他免疫介导的炎症性疾病机制【19,42– 44】。 最近，Kawabata等人验证了，类风湿关节炎滑膜组织与对照关节滑膜组织细胞核 HDAC蛋白质水平相比是增高的，TNF-α增强类风湿关节炎滑膜成纤维细胞细胞核HDAC活性， 24小时mRNA水平和48小时蛋白水平 [45]. 堀内等，报告说 HDAC活性增加可能参与类风湿关节炎的发病机制，一个相似的结果。通过调节滑膜组织细胞周期，可能有助于滑膜炎症[ 46 ]。此外，组蛋白去乙酰化酶抑制剂抑制滑膜细胞增殖22,47,48]。所以，10h2da对 HDAC活性的抑制，可能是一个治疗类风湿关节炎新靶点。
为了明确10H2DA控制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞下游基因及相关通路， 我们进行了转录组芯片验证。结果表明， 类风湿关节炎滑膜成纤维细胞PI3K–AKT通路相关基因受到10H2DA诱导的组蛋白超乙酰化作用抑制，细胞因子–细胞因子受体相互作用相关基因明显地过度表达。
PI3Ks是脂质激酶，在细胞表面受体触发信号转导途径扮演重要角色。 PI3K基因失活或药物抑制损害免疫反应和减少自身免疫和炎症反应的敏感性，尤其是类风湿关节炎和其他自身免疫性疾病。再者，PI3K的作用就是调节类风湿关节炎滑膜成纤维细胞，导致一个轻微形式的炎症，糜烂性关节炎和TNF-α介导的软骨破坏。发现PI3K在类风湿关节炎患者滑膜组织中高表达【49]。特别要注意的是，以前的研究发现组蛋白去乙酰化酶抑制剂可能调节PI3K信号通路[50– 53 ]。我们的研究还表明对10h2da抑制滑膜组织过度增殖的机理与抑制HDAC相关，下调PI3K和Akt的磷酸化。
类风湿关节炎患者炎症反应的调节是一个复杂的过程，HDACi开发将是一个治疗类风湿关节炎很有前途的一类药物。基于这些结果，10h2da可能是脂肪酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂，下调PI3K–AKT信号通路靶基因，它可能是一个治疗类风湿性关节炎的潜在药物。
Difgene Sig GO
Fig. 2. GO analysis of different genes, all different genes were subjected to GO analysis to find more concrete function description, the database suggested that 117 GOs show obvious enrichment(−log(p-value) ﹥ 2). A. 51 GOs are up-regulated. B. 66 GOs are down-regulated.